二級生物安全柜是能防止實驗操作處理過程中某些含有危險性或未知性生物微粒發生氣溶膠散逸的箱型空氣凈化負壓安全裝置。是實驗室生物安全中防護屏障中基本的安全防護設備。
二級生物安全柜是目前應用為廣泛的柜型。按照《中華人民共和國醫藥行業標準YY0569-2005生物安全柜》中的規定，二級生物安全柜依照入口氣流風速、排氣方式和循環方式可分為4個：A1型，A2型，B1型和B2型。
所有的二級生物安全柜都可工作人員、環境和產品的保護。
A1型：前窗氣流速度小量或測量平均值應至少為0.38m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環至工作區，30%的氣體通過排氣口過濾排出。
A2型：前窗氣流速度小量或測量平均值應至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環至工作區，30%的氣體通過排氣口過濾排出。
二級B型生物安全柜均為連接排氣系統的安全柜。連接安全柜排氣導管的風機連接緊急 供應電源，目的在斷電下仍可保持安全柜負壓，以免危險氣體泄漏出實驗室。其前窗氣流速度小量或測量平均值應至少為0.5m/s(100fpm)。
B1型：70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除，30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環至工作區。
B2型：全排型安全柜，無內部循環氣流，可同時生物性和化學性的安全控制，可以操作揮發性化學品和揮發性核放射物作為添加劑的微生物實驗。
二級生物安全柜主要結構與配置：
1、結構：電源開關、送排風速傳感器、送排風高效過濾器、風機、紫外燈、保險絲座、不銹鋼工作腔、下支架、電氣箱、照明、水氣端口、污口閥、箱體、操作面板、前窗、集液槽、負壓通道、可調地腳、萬向腳輪。
2、配置：直流電機、節能模式、顯示屏、插座（含備用）、水氣閥門、紫外燈預約開啟、前窗、全部開啟及任意定位升降（上下限報警系統）、側窗、支架、人機對話功能。
